
酵母表達
技術簡介
酵母表達系統兼有原核和高等真核系統的優點,已廣泛用于外源蛋白的表達, 其優勢表現在:1. 表達水平高,既可在胞內表達,又可分泌型表達; 2. 發酵工藝成熟,易放大;3. 外源蛋白基因遺傳穩定。一般外源蛋白基因整合到畢赤酵母染色體上,隨染色體復制而復制,不易丟失; 4. 作為真核表達系統,畢赤酵母具有真核生物的亞細胞結構,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能。因此,酵母表達系統為蛋白的生理活性研究提供了強有力的工具。
服務內容
| 服務項目 | 服務內容 |
| 基因合成和基因亞克隆, 原核表達載體構建 | 可為客戶免費提供密碼子優化服務, 公司載體庫覆蓋不同酵母表達載體,可滿足客戶不同需求:分泌表達(如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K等)或胞內表達(如pPICZA 、pPIC3.5K、pESC-系列等) |
| 酵母宿主菌轉化 | 提供畢赤酵母轉化服務 |
| 目的蛋白表達 | 培養條件優化(培養基,菌體密度,甲醇濃度,誘導時間等),提高目標蛋白的表達量。可根據客戶需求進行目的蛋白小量表達,也可大量表達 |
| 目的蛋白純化和濃縮 | 多步純化獲得目的蛋白,可對包涵體復性后獲得 |
| 目的蛋白檢測 | SDS-PAGE、Western Blot、質譜等多種檢測方法對目的蛋白分析檢測 |
技術優勢
1. 公司專業的技術團隊擁有多年的蛋白表達純化實驗經驗,規范的蛋白表達純化實驗平臺確保客戶的實驗更高效。
2. 免費為客戶提供實驗可行性分析報告,五千多種常見蛋白表達條件數據庫,對蛋白表達的預測成功率高達75%。通過生物信息學分析及水平優化,活性蛋白表達率上升30%。
3. 公司豐富的載體庫,覆蓋各種商業化表達載體,并可根據客戶實際需求改造表達載體,不同的大腸桿菌宿主菌也可滿足客戶常規需求,為蛋白表達提供最高效率。
服務流程
蛋白表達分析優化報告——表達載體構建——轉化宿主菌——優化培養誘導條件——蛋白小量表達及可溶性鑒定——蛋白大量表達、純化——檢測分析
您需要提供以下材料:
1 待表達蛋白的基因序列以及待表達蛋白的基本特性(蛋白來源為分泌蛋白還是胞內蛋白,天然蛋白是否存在翻譯后修飾,蛋白是否穩定,蛋白的pI值等)。
2 所需純化蛋白的量及用途,要求的純度、是否需要帶標簽以及帶何種類型的標簽。
3 發貨的具體要求:如緩沖液要求,是否凍干等。
您將獲得的實驗結果:
1. 實驗過程中涉及到的蛋白編碼基因克隆的測序報告;
2. 蛋白誘導表達的Western blot或SDS-PAGE檢測報告;
3. 實驗過程中所涉及到的重組細菌菌株和重組酵母菌株、目的基因質粒及亞克隆質粒;
4. 提供客戶要求量的純化或濃縮的重組蛋白樣品。