技術簡介

酵母單雜交(Yeast one-hybrid)是根據DNA結合蛋白(即轉錄因子)與DNA順式作用元件結合調控報道基因表達的原理，克隆與靶元件特異結合的轉錄因子基因(cDNA)的有效方法。其理論基礎是：許多真核生物的轉錄激活子由物理和功能上獨立的DNA結合區(DNA-binding domain BD)和轉錄激活區(Activation domain AD)組成，因此可構建各種基因與AD的融合表達載體，在酵母中表達為融合蛋白時，根據報道基因的表達情況，便能篩選出與靶元件有特異結合區域的蛋白。理論上，在單雜交檢測中，任何靶元件都可被用于篩選一種與之有特異結合區域的蛋白。

應用酵母單雜交體系已經驗證了許多已知的DNA與蛋白質之間的相互作用，同時發現了新的DNA與蛋白質的相互作用，并由此找到了多種新的轉錄因子。

酵母單雜交（上）與酵母雙雜交（下）原理圖

應用領域

酵母單雜交方法檢測特定轉錄因子與順式作用元件專一性相互作用的敏感性和可靠性，現已被廣泛用于克隆細胞中含量微弱的、用生化手段難以純化的特定轉錄因子。

目前，在研究DNA—蛋白質相互作用中，酵母單雜交體系主要有以下3種用途：

①確定已知DNA—蛋白質之間是否存在相互作用;

②分離結合于目的順式調控元件或其他短DNA結合位點蛋白的新基因;

③定位已經證實的具有相互作用的DNA結合蛋白的DNA結合結構域，以及準確定位與DNA結合的核苷酸序列。

服務內容

技術優勢

1. 專業的技術團隊使您的實驗高效、準確；

2. 豐富的分子實驗基礎，尤其在酵母雜交中積累了大量的實踐經驗，有成熟的實驗技術，滿足客戶不同的實驗需求

服務流程(圖)

酵母單雜交文庫構建——誘餌載體構建——誘餌載體自激活檢測——誘餌質粒轉化酵母感受態細胞及驗證—文庫質粒轉化酵母感受態細胞——文庫篩選、分析

您需要提供以下材料

1.  新鮮組織材料、凍存材料或高質量RNA、誘餌基因的模板

2. 盡可能全面的實驗相關信息

您將獲得以下結果