武漢轉導生物實驗室有限公司

擬南芥轉基因

服務內容：

技術簡介農桿菌是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位(受傷處的細胞會分泌大量酚類化合物,從而使農桿菌移向這些細胞)，并誘導產生冠癭瘤或發狀根。根癌農桿菌和發根農桿菌中細胞中分別含有Ti質粒和Ri質粒，其上有一段T-DNA，農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后，可將T-DNA插入到植物基因組中,并且可以通過減數分裂穩定的遺傳給后代，這一特性成為農桿菌介導法植物轉基因的理論基礎。將目的基因片段構建到植物表達載體上（改造過的Ti質粒），轉入農桿菌后T-DNA會與一系列Vir蛋白結合，在農桿菌侵染宿主時，目的基因的T-DNA片段會在該系列蛋白作用下轉入宿主細胞并整合到宿主基因組內，從而實現轉基因。應用領域農桿菌介導的擬南芥轉基因研究，成為研究基因功能的重要手段，該技術可以使重組生物增加人們所期望的新性狀，培育出新品種；是開展植物基因工程研究的經典方法。

服務內容

項目分類	服務內容
植物載體構建	將目的基因片段構建至植物載體中
農桿菌轉化	將構建好的質粒轉化農桿菌GV3101或EHA105
轉基因擬南芥篩選鑒定	農桿菌介導遺傳轉化、篩選（花序侵染）；T0代種子篩選；T1代陽性苗的PCR鑒定

注：1. 擬南芥品種：哥倫比亞

2. 根據不同的載體系統及待轉基因的特性，有時轉基因植株生長周期會發生變化；如果待轉基因為敗育、致死或發育、開花相關基因，我們不能保證實驗結果及周期。

3. 因待轉基因特性具有不確定性，且實驗周期較長，自2015年8月1日起的新訂單，如果遇到個別實驗失敗，無法篩得陽性株，仍需酌情收取30%實驗基礎費用，敬請理解。

技術優勢

1. 專業技術平臺。從事多年轉基因植物的技術團隊，多種轉化技術手段保證實驗成功率。

2. 高效的實驗機制。全年不間斷種植轉基因受體，隨時開展轉基因實驗項目。

3. 提供實驗全程進展，提供遺傳轉化、篩選的部分圖片和T0代轉基因苗，外源基因PCR檢測等瓊脂糖凝膠電泳圖。

服務流程(圖)

載體構建——農桿菌轉化——花序侵染——分批收取種子及篩選(T0)——T1代陽性苗的PCR鑒定

服務周期

1. 等待野生型擬南芥開花批次（每半月一批）/ 載體構建及農桿菌轉化周期

2. 花序侵染（T0） 30天

3. 分批收取種子及篩選（T1） 40天

4. 真葉期移栽及T1代苗PCR鑒定 20天

5. T1代陽性苗収種 60天

您需要提供以下材料：

1. 目的基因的模板與載體構建方案

2. 盡可能詳細的實驗信息與其他要求

您將獲得以下結果：

1. 遺傳轉化與篩選的部分圖片；

2. T1代轉基因苗外源基因PCR檢測的瓊脂糖凝膠電泳圖；

3. T1代轉基因苗及其種子。（3個陽性株系）

實驗結果圖片示例

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