技術簡介

實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反應體系中加入熒光標記物，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現真正實現了絕對定量，而且具有靈敏度和特異性高，能實現多重反應、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。隨著生物芯片技術和熒光探針定量技術的結合，熒光定量PCR在醫學檢測及其他各個領域中的應用前景十分廣闊。

技術原理：

熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種：熒光探針和熒光染料。

使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時，我們首先在PCR反應體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發射一定量的熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。

Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結合的特點，以及探針內熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現高靈敏度，嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。

應用領域

1. 臨床疾病診斷

各型肝炎、艾滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價；地中海貧血、血友病、性別發育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優生優育檢測；腫瘤標志物及瘤基因檢測實現腫瘤病診斷；遺傳基因檢測實現遺傳病診斷。

2. 動物疾病檢測

禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。

3. 食品安全

食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業阪崎腸桿菌等檢測。

4. 科學研究

醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。

服務內容

注：1. 提供免費的預實驗，提供免費的內參組；

2. 每一個樣品都包含三個實驗重復。

技術優勢

1. 先進的硬件設備：依托 Bio-Rad CFX96 定量PCR系統，為您提供實時熒光定量PCR全套技術服務。實驗室嚴格分區，避免檢測樣品污染；

2.專業的技術團隊擁有多年的熒光定量PCR實驗經驗，優化的引物使實驗效率最大化；精湛的操作水平，讓您的實驗更加快速、準確；

3.真實準確的定量結果：每一個樣品都包含三個實驗重復；

4.本公司提供高質量、高性價比熒光定量PCR技術服務，免費提供內參基因和PCR預實驗條件摸索。

服務流程(圖)

高質量總RNA提取，逆轉錄成cDNA(此技術服務可選)——根據客戶提供基因序列設計定量引物或探針——預實驗優化PCR反應條件——Real-Time PCR——實驗結果分析

您需要提供以下材料：

1. 新鮮的且足量的材料，或直接提供純化好的總RNA；

2. 提供已知的基因序列，GenBank登陸號，詳細參考文獻，樣品來源等。

（如果您尚未獲取該樣品該基因的序列，僅有同源物種基因信息，您可能還需要進行基因釣取實驗）

您將獲得以下結果：

1. 完整的實驗過程報告；

2. 數據分析結果（發表級圖片形式）。

交付數據及產品

1. 完整的實驗過程報告；

2. 數據分析結果（發表級圖片形式）。

檢測結果示例：